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Chinese Journal of Neurotraumatic Surgery(Electronic Edition) ›› 2015, Vol. 01 ›› Issue (01): 28-33. doi: 10.3877/cma.j.issn.2095-9141.2015.01.008

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靶向抑制frizzled-2对脑损伤后wnt5a/Ca2+介导的神经细胞钙超载的抑制性研究

  

  1. 1.100700,北京军区总医院附属八一脑科医院
  • Received:2014-11-28 Online:2015-01-11 Published:2024-11-29

Abstract:

目的

探讨Wnt5a/Frizzled-2信号在创伤性颅脑损伤(TBI)后神经细胞钙超载过程中的作用。

方法

体内实验:成年Sprague-Dawley大鼠(96只),随机分为正常组A(32只),单纯损伤组B(32只)和RNAi抑制组C(32只)。B组和C组Fenny 式法制作中型颅脑损伤模型。其中C组模型建立前48 h采用立体定向海马区注射RNAi以抑制Frizzled-2的表达。伤后24 h处死大鼠,取伤侧海马组织,用western blotting 方法检测其中Frizzled-2 和Wnt5a 含量,用免疫荧光染色和激光共聚焦显微镜检测其中钙离子浓度。单因素方差分析比较各组间的差别。

结果

A组大鼠海马组织细胞中稳定表达着Wnt5a/Frizzled-2 信号。TBI 后,与A 组相比,B 组海马组织中的Wnt5a 和Frizzled-2的表达分别升高了2倍和5倍(P<0.01),海马细胞中钙离子的含量显著增高(P<0.01)。与B组相比,随着Frizzled-2的抑制,C组海马细胞中的Wnt5a和Frizzled-2的表达分别降低1倍、3.5倍(P<0.01),同时细胞中的钙离子含量显著降低1.5 倍,接近A 组(P<0.01)。

结论

在生理和病理条件下,Wnt5a/Frizzled-2信号在调节神经细胞中的钙离子浓度变化中起到重要的作用,同时我们的研究提示该信号的相关重要组成因子Wnt5a,Fzd2 和P-CamKII以及针对frizzled-2 设计的特异性RNAi可以作为日后TBI研究和治疗的相关靶点。

Key words: 脑损伤, Frizzled-2, Wnt5a, P-CamKII, Ca2+

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